2、蛋白酶響應面可靠性設計

（1）響應面設計方案及結果

響應面實驗結果見表4，選用Des遠nExpert8.0.6手機軟件對表4中數(shù)據開展標準差、顯著性分析，結果見表5。

以酶解時間、pH、溫度、加酶量為回應自變量，α-胃蛋白酶活力抑制率為響應值，根據響應面線性回歸方程剖析得知，黎麥活性多肽液具備α-胃蛋白酶活力抑制率的多元化二次線性擬合線性回歸方程為：

Y=44.09 2.53A一1.87B 4.39C 4.47D 1.86AB 1.61AC 7.67AD 9.20BC 1.90BD一4.19CD一9.11A²—12.84B²—1.78C²—9.79D²。

19CD一9.11A2—12.8482—1.78C2—9.79D2。

由表5得知，實體模型的P＜0.0001，表明實體模型重歸差別極明顯，失擬項P=0.8453＞0.05，不明顯，表明擬合程度優(yōu)良，能真正反應具體情況，實體模型靠譜；實體模型重歸決定系數(shù)R²=0.9728＞0.9，表明α-胃蛋白酶活力抑制率結果與方程式預測分析結果具備一致性，實體模型相關性好。實驗實體模型校準指數(shù)R_Adj²=0.9457，說明實體模型線性擬合程度高。表明有94.57％實驗結果值可以用此實體模型來表述，因而結果靠譜，實體模型能夠對α-胃蛋白酶活力抑制率值實現(xiàn)剖析和預測分析。由重歸表達式中一次項系數(shù)得知，各要素對α-胃蛋白酶活力抑制率功效尺寸次序為；加酶量(D)＞溫度(C)＞酶解時問(A)＞pH(B)。

（2）響應面分析與標準提升

響應面曲線圖剖析，各要素問等高線圖和配對t檢驗見圖6。

由圖6得知，pH與時間、溫度與pH、加酶量與溫度配對t檢驗的顯著性差異與表5中交互項P值的解析結果一致。a，c，e均呈橢圓型，說明要素問配對t檢驗明顯，等值線的形態(tài)能夠分辨配對t檢驗的高低，3組等高線圖里加酶量與溫度配對t檢驗最好是，等值線中的曲線圖緊緊圍繞著響應面在中國問處產生端點，即抑制率最高值。a，c，e響應面圖張口都朝下，伴隨著每一個要素值的提高而響應值擴大，在做到響應值最高處后，伴隨著要素值的增加而響應值減少，響應面的端點即是較大響應值。

經DesignExpert8.0.6手機軟件剖析獲得提升標準為：酶解時間2.22h、pH8.95、溫度60℃、加酶量0.53×10⁴U／g，在這里前提下，曠胃蛋白酶活力抑制率的基礎理論最高值為47.82％，選用這一結果并聯(lián)系實際標準，將酶解標準改成：酶解時間2h、pH9.0、溫度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，獲得的檢驗結果顯示為45.54％，與基礎理論估計值基本一致，創(chuàng)建的建模能夠比較好地體現(xiàn)黎麥活性多肽液具備抑止α-胃蛋白酶活力的工作能力，與此同時活性多肽得率為63.54％。

三、結果

以黎麥蛋白質為實驗原材料，科學研究酶解后的活性多肽對α-胃蛋白酶活力的抑制率，挑選出最可用酶。在單要素酶解情況下，挑選酶解時間、pH、溫度、加酶量開展Box-Behnken試驗設計，提升數(shù)據顯示：加酶量和酶解溫度對α-胃蛋白酶活力的抑制效果比pH和酶解時間要好。實驗結果顯示：制取黎麥活性多肽的較佳獲取加工工藝為：酶解時問2h、pH9、溫度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，在這里前提下α-胃蛋白酶活力抑制率為45.54％。為了更好地提升活性多肽液對α-胃蛋白酶的活力抑制效果，還需對酶解活性多肽液開展進一步的提純解決。