2、單因素實驗

（1）酸醇比對PA提取效果的影響

在提取溫度為35℃、提取時間50min、料液比為1:30、提取次數1次、沉淀pH=7的條件下，考察酸醇比對PA提取效果的影響，結果見圖5。

如圖5所示，隨著酸的濃度增加，PA的含量與回收率均呈現先上升后下降的趨勢，在1.2:100處達到最高。當酸醇比小于1.2:100時，酸醇對PA的選擇性強于磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol，簡稱為PE）和磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine，簡稱為PE)，故PA含量與回收率會隨著酸的增加而上升。當酸醇比大于1.2:100后，酸醇對PA的選擇性達到峰值，對PI與PE的選擇性卻增加，PA的含量與回收率均下降，PA的最佳酸醇比為1.2:100。

（2）時間對PA提取效果的影響

在提取溫度為35℃、酸醇比1.2:100、料液比為1:30、提取次數1次、沉淀pH=7的條件下，考察提取時間對PA提取效果的影響，結果見圖6。

如圖6所示，隨著時間的延長，產品中PA的含量逐漸增加，于70min趨于平衡，而PA回收率卻在70min后增長變緩。當提取時間達到70min，原料中的大部分PA已被酸醇萃取出來，PA回收率趨于平衡。提取時間超過70min，原料中的PE、PI等組分持續(xù)擴散進入酸醇之中，故PA含量逐漸下降，故理想的提取時間為70min。

（3）料液比對PA提取效果的影響

在提取溫度為35℃、酸醇比1.2:100、提取時間70min、提取次數1次、沉淀pH=7的條件下，考察料液比對PA提取效果的影響，結果見圖7。

如圖7所示，PA的含量與回收率皆隨著料液比的增加而上升。當料液比達到1:20時，增長放緩，至1:30時，PA含量達到最大。當料液比小于1:30時，溶液濃度較高，PI、PE與PA競爭性溶解擴散入酸醇中，隨著料液比提高，傳質動力增加，PA擴散速度加劇，顯著高于其他組分，故PA含量與回收率不斷增大；當料液比達到1:30時，PA萃取溶解量最大，產品PA含量與回收率達到最高值；但料液比大于1:30時，少量的PI與PE逐漸擴散進酸醇萃取液中，故PA含量出現了下降，但回收率不變。基于資源最大化原則，最佳料液比為1:30。

（4）提取溫度對PA提取效果的影響

在料液比1:30、酸醇比1.2:100、提取時間70min、提取次數1次、沉淀pH=7的條件下，考察提取溫度對PA提取效果的影響，結果見圖8。

如圖8，隨著溫度的升高，PA的含量和回收率上升至45℃時達到頂峰后迅速下降。溫度升高導致磷脂各成分分子運動加劇，利于磷脂分子向萃取液中的擴散，故PA含量增幅不顯著。

當溫度大于45℃后，磷脂易在高溫下結塊，增加了萃取PA的難度，PA的含量與回收率均下降顯著，故最適宜溫度為45℃。

（5）提取次數對PA提取效果的影響

在料液比l：30、酸醇比1.2:100、提取時間70min、提取溫度45℃、沉淀pH=7的條件下，考察提取次數對PA提取效果的影響，結果見圖9。

如圖9所示，隨著提取次數的增加，PA的含量出現輕微下降，1次可能已萃取出磷脂顆粒中絕大部分的PA，而隨著提取次數的增加，磷脂其他組分如PI和PE由于缺乏PA的競爭性溶解也逐漸擴散入酸醇中，后續(xù)與PA同時沉淀出來，造成含量下降，而回收率略有提升。故最佳的提取次數為1次。

(6)pH對PA分離效果的影響

在料液比1:30、酸醇比1.2:100、提取時間70min、提取溫度45℃、提取次數1次的條件下，考察pH對PA沉淀效果的影響，結果見圖10。

如圖10所示，隨著pH的升高，PA含量整體呈現逐級上升的趨勢，至pH=8時達到最高。主要原因在于，PA為弱酸性物質，在弱堿性條件下極易生成PA白色沉淀。蔣曉菲等的研究證實當pH＞5時PA溶液中出現白色絮狀樣的固體沉淀，同時部分PI與PE也會析出，本實驗中亦觀察到此現象。取沉淀溶于流動性中，經HPLC分析表明沉淀為少量PA與大量PE、PI的混合物。由于PA與PE、PI所帶電荷不同，PA帶有兩個負電荷，故在pH＜6時不易沉淀，優(yōu)先沉淀下來的是帶有負電荷較少的PE與PI。當pH較低時，PA生成量有限，故沉淀中PA的含量和回收率都極低，大部分的PA仍然溶解在酸醇中，而隨著pH的增大，PA開始沉淀DTI。當pH＞8后，PI和PE沉淀過多，故PA的含量有所下降。故最佳方法為先調節(jié)pH=5濾去雜質，后調節(jié)pH=8沉淀PA。

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